一、藥敏試驗(yàn)操作步驟
1制作待檢菌液
在超凈工作臺(tái)內(nèi)挑取培養(yǎng)18-24h普通營養(yǎng)瓊脂平板上的菌落，懸于含3ml無菌生理鹽水的試管中。混勻后與比濁管比濁，調(diào)整濁度至0.5麥?zhǔn)蠘?biāo)準(zhǔn)（相當(dāng)于1-2*10 cfu/ml）。
2接種細(xì)菌
在超凈工作臺(tái)內(nèi)用無菌棉拭子蘸取菌液，在管壁上擠壓去掉多余的菌液，均勻涂抹整個(gè)平板表面，最后沿平板內(nèi)緣涂抹一周（用接種環(huán)密集劃線法也可以）。
3貼藥敏片
將涂抹均勻的培養(yǎng)皿底部用記號(hào)筆做好標(biāo)記，眼科鑷子在酒精燈上灼燒滅菌待冷卻后，鑷取各種購買或自制的藥敏片，分別貼于相應(yīng)的位置上，用鑷子輕輕按壓紙片使藥敏紙片與培養(yǎng)基表面密貼；藥敏紙片應(yīng)在培養(yǎng)基表面均勻分布，各紙片中心距離大于24mm，紙片距邊緣距離大于15mm，這樣一個(gè)直徑90mm的培養(yǎng)皿可貼7個(gè)藥敏紙片。
4培養(yǎng)
最后將貼好藥敏紙片的平板倒置放于37℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱，培養(yǎng)16-18h后取出觀察結(jié)果。
二、結(jié)果觀察與判定
1抑菌圈直徑觀察
抑菌圈直徑以肉眼見不到細(xì)菌明顯生長的邊緣為限（變形桿菌可蔓延生長至某些抗微生物的抑菌圈內(nèi)，表現(xiàn)為一種細(xì)薄微弱的生長，形成一層明顯的抑制性生長環(huán)，對(duì)于這種情況應(yīng)忽略不計(jì)；對(duì)于磺胺類藥物，應(yīng)忽略抑菌圈內(nèi)輕微的細(xì)菌生長，少于20%的菌苔，以明顯的邊緣為抑菌圈直徑）。
2根據(jù)藥敏片周圍抑菌圈的大小，判定藥物的敏感度
敏感：表示被測菌株所引起的感染可以用常用量該抗菌藥物治愈。
中介：表示被測菌株對(duì)常規(guī)用藥體液或組織中的藥物濃度的反應(yīng)率低于敏感菌株，使用高于正常給藥量有療效。
耐藥：表示被測菌株不能被常用劑量藥物抑制，臨床療效不佳。
3判定
不同菌株結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)不同；不同藥物判定標(biāo)準(zhǔn)不同。最終判定結(jié)果應(yīng)以WS/T125-1999列表中對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)為準(zhǔn)。
備注：商品要通常按照說明書用量原倍配置藥敏紙片，可視情況做 2 倍、4 倍濃度配置；商品藥敏感性判定通常Φ﹥20mm 極敏；15-20mm 高敏；10-14mm 中敏；＜10mm 不敏感；某些原料藥按國標(biāo)規(guī)定判定，沒有具體依據(jù)的通常也按照﹥20mm 極敏；15-20mm 高敏；10-14mm 中敏；＜10mm 不敏感判定；
可以用抑菌圈測量儀自動(dòng)測量抑菌圈大小以及自動(dòng)判定結(jié)果。
